中文E.coli O157:H7 PCR ഡിറ്റക്ഷൻ കിറ്റ്
ഉത്പന്നത്തിന്റെ പേര്
E.coli O157:H7 PCR ഡിറ്റക്ഷൻ കിറ്റ് (ലിയോഫിലൈസ്ഡ്)
വലിപ്പം
48 ടെസ്റ്റുകൾ/കിറ്റ്, 50 ടെസ്റ്റുകൾ/കിറ്റ്
ഉദ്ദേശിക്കുന്ന ഉപയോഗത്തിന്
Escherichia coli O157:H7 (E.coli O157:H7) വെറോ ടോക്സിൻ വലിയ അളവിൽ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്ന എന്ററോബാക്ടീരിയേസി ജനുസ്സിൽ പെട്ട ഒരു ഗ്രാം നെഗറ്റീവ് ബാക്ടീരിയയാണ്.ക്ലിനിക്കലായി, ഇത് സാധാരണയായി പെട്ടെന്ന് സംഭവിക്കുന്നത് കഠിനമായ വയറുവേദനയും വെള്ളമുള്ള വയറിളക്കവുമാണ്, തുടർന്ന് കുറച്ച് ദിവസങ്ങൾക്ക് ശേഷം ഹെമറാജിക് വയറിളക്കം ഉണ്ടാകുന്നു, ഇത് പനിയോ പനിയോ ഇല്ലാതിരിക്കുകയും കഠിനമായ കേസുകളിൽ മരണത്തിലേക്ക് നയിക്കുകയും ചെയ്യും.ഈ കിറ്റ് തത്സമയ PCR തത്വം ഉപയോഗിച്ച് ഭക്ഷണം, ജല സാമ്പിളുകൾ, മലം, ഛർദ്ദി, ബാക്ടീരിയ വർദ്ധിപ്പിക്കുന്ന ദ്രാവകം, മറ്റ് സാമ്പിളുകൾ എന്നിവയിൽ Escherichia coli O157:H7-ന്റെ ഗുണപരമായ കണ്ടെത്തലിന് അനുയോജ്യമാണ്. കിറ്റ് ഒരു എല്ലാ-റെഡി PCR സിസ്റ്റമാണ് Lyophilized), അതിൽ DNA ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ എൻസൈം, റിയാക്ഷൻ ബഫർ, പ്രത്യേക പ്രൈമറുകൾ, ഫ്ലൂറസന്റ് PCR കണ്ടെത്തലിന് ആവശ്യമായ പ്രോബുകൾ എന്നിവ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.
ഉൽപ്പന്ന ഉള്ളടക്കം
| ഘടകങ്ങൾ | പാക്കേജ് | സ്പെസിഫിക്കേഷൻ | ഘടകം |
| E.coli O157:H7 PCR മിക്സ് | 1 × കുപ്പി (ലിയോഫിലൈസ്ഡ് പൊടി) | 50 ടെസ്റ്റ് | dNTPs, MgCl2, പ്രൈമറുകൾ, പ്രോബ്സ്, റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റേസ്, ടാക്ക് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ് |
| 6×0.2ml 8 നന്നായി-സ്ട്രിപ്പ് ട്യൂബ്(ലിയോഫിലൈസ്ഡ്) | 48 ടെസ്റ്റ് | ||
| പോസിറ്റീവ് നിയന്ത്രണം | 1*0.2ml ട്യൂബ് (ലയോഫിലൈസ്ഡ്) | 10 ടെസ്റ്റുകൾ | E.coli O157:H7 പ്രത്യേക ശകലങ്ങൾ അടങ്ങിയ പ്ലാസ്മിഡ് |
| പിരിച്ചുവിടുന്ന പരിഹാരം | 1.5 മില്ലി ക്രയോട്യൂബ് | 500uL | / |
| നെഗറ്റീവ് നിയന്ത്രണം | 1.5 മില്ലി ക്രയോട്യൂബ് | 200uL | 0.9%NaCl |
സംഭരണവും ഷെൽഫ് ലൈഫും
(1) കിറ്റ് ഊഷ്മാവിൽ കൊണ്ടുപോകാം.
(2) ഷെൽഫ് ആയുസ്സ് -20℃-ൽ 18 മാസവും 2℃~30℃-ൽ 12 മാസവുമാണ്.
(3) ഉൽപ്പാദന തീയതിയും കാലഹരണ തീയതിയും കിറ്റിലെ ലേബൽ കാണുക.
(4) ലയോഫിലൈസ്ഡ് പൗഡർ വേർഷൻ റിയാജന്റ് പിരിച്ചുവിട്ടതിനുശേഷം -20℃-ൽ സൂക്ഷിക്കണം, ആവർത്തിച്ചുള്ള ഫ്രീസ്-തൗ 4 തവണയിൽ കുറവായിരിക്കണം.
ഉപകരണങ്ങൾ
GENECHECKER UF-150, UF-300 തൽസമയ ഫ്ലൂറസെൻസ് PCR ഉപകരണം.
ഓപ്പറേഷൻ ഡയഗ്രം
a) കുപ്പി പതിപ്പ്:
b) 8 നന്നായി-സ്ട്രിപ്പ് ട്യൂബ് പതിപ്പ്:
പിസിആർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ
ശുപാർശ ചെയ്തക്രമീകരണം
| ഘട്ടം | സൈക്കിൾ | താപനില (℃) | സമയം | ഫ്ലൂറസെൻസ് ചാനൽ |
| 1 | 1 | 95 | 2മിനിറ്റ് | |
| 2 | 40 | 95 | 5s | |
| 60 | 10സെ | FAM ഫ്ലൂറസെൻസ് ശേഖരിക്കുക |
*ശ്രദ്ധിക്കുക: FAM ഫ്ലൂറസെൻസ് ചാനലിന്റെ സിഗ്നൽ 60℃-ൽ ശേഖരിക്കും.
ടെസ്റ്റ് ഫലങ്ങൾ വ്യാഖ്യാനിക്കുന്നു
| ചാനൽ | ഫലങ്ങളുടെ വ്യാഖ്യാനം |
| FAM ചാനൽ | |
| Ct≤35 | E.coli O157:H7 പോസിറ്റീവ് |
| Undet | E.coli O157:H7 നെഗറ്റീവ് |
| 35 | സംശയാസ്പദമായ ഫലം, വീണ്ടും പരിശോധിക്കുക* |
*FAM ചാനലിന്റെ പുനഃപരിശോധനാ ഫലത്തിന് Ct മൂല്യം ≤40 ഉണ്ടായിരിക്കുകയും സാധാരണ “S” ആകൃതി ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ കർവ് കാണിക്കുകയും ചെയ്യുന്നുവെങ്കിൽ, ഫലം പോസിറ്റീവ് ആയി വ്യാഖ്യാനിക്കപ്പെടുന്നു, അല്ലാത്തപക്ഷം അത് നെഗറ്റീവ് ആയിരിക്കും.
