Listeria monocytogenes PCR ഡിറ്റക്ഷൻ കിറ്റ്
ഉത്പന്നത്തിന്റെ പേര്
Listeria monocytogenes PCR ഡിറ്റക്ഷൻ കിറ്റ്
വലിപ്പം
48 ടെസ്റ്റുകൾ/കിറ്റ്, 50 ടെസ്റ്റുകൾ/കിറ്റ്
ഉദ്ദേശിക്കുന്ന ഉപയോഗത്തിന്
4 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിനും 45 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിനും ഇടയിൽ വളരാൻ കഴിയുന്ന ഒരു ഗ്രാം പോസിറ്റീവ് മൈക്രോബാക്ടീരിയമാണ് ലിസ്റ്റീരിയ മോണോസൈറ്റോജെൻസ്.ശീതീകരിച്ച ഭക്ഷണത്തിൽ മനുഷ്യന്റെ ആരോഗ്യത്തെ അപകടപ്പെടുത്തുന്ന പ്രധാന രോഗാണുക്കളിൽ ഒന്നാണിത്.അണുബാധയുടെ പ്രധാന പ്രകടനങ്ങൾ സെപ്റ്റിസീമിയ, മെനിഞ്ചൈറ്റിസ്, മോണോ ന്യൂക്ലിയോസിസ് എന്നിവയാണ്.തത്സമയ ഫ്ലൂറസെൻസ് പിസിആർ തത്വം ഉപയോഗിച്ച് ഭക്ഷണം, ജല സാമ്പിളുകൾ, മലം, ഛർദ്ദി, ബാക്ടീരിയ വർദ്ധിപ്പിക്കുന്ന ദ്രാവകം, മറ്റ് സാമ്പിളുകൾ എന്നിവയിലെ ലിസ്റ്റീരിയ മോണോസൈറ്റോജെനുകൾ ഗുണപരമായി കണ്ടെത്തുന്നതിന് ഈ കിറ്റ് അനുയോജ്യമാണ്. , അതിൽ ഡിഎൻഎ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ എൻസൈം, റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റേസ്, റിയാക്ഷൻ ബഫർ, ഫ്ലൂറസന്റ് പിസിആർ കണ്ടെത്തലിന് ആവശ്യമായ പ്രത്യേക പ്രൈമറുകൾ, പ്രോബുകൾ എന്നിവ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.
സംഭരണവും ഷെൽഫ് ലൈഫും
(1) കിറ്റ് ഊഷ്മാവിൽ കൊണ്ടുപോകാം.
(2) ഷെൽഫ് ആയുസ്സ് -20℃-ൽ 18 മാസവും 2℃~30℃-ൽ 12 മാസവുമാണ്.
(3) ഉൽപ്പാദന തീയതിയും കാലഹരണ തീയതിയും കിറ്റിലെ ലേബൽ കാണുക.
(4) ലയോഫിലൈസ്ഡ് പൗഡർ വേർഷൻ റിയാജന്റ് പിരിച്ചുവിട്ടതിനുശേഷം -20℃-ൽ സൂക്ഷിക്കണം, ആവർത്തിച്ചുള്ള ഫ്രീസ്-തൗ 4 തവണയിൽ കുറവായിരിക്കണം.
ഉൽപ്പന്ന ഉള്ളടക്കം
ഘടകങ്ങൾ | പാക്കേജ് | സ്പെസിഫിക്കേഷൻ | ഘടകം |
ലിസ്റ്റീരിയ മോണോസൈറ്റോജെൻസ് പിസിആർ മിക്സ് | 1 × കുപ്പി (ലിയോഫിലൈസ്ഡ് പൊടി) | 50 ടെസ്റ്റ് | dNTPs, MgCl2, പ്രൈമറുകൾ, പ്രോബ്സ്, റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റേസ്, ടാക്ക് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ് |
6×0.2ml 8 നന്നായി-സ്ട്രിപ്പ് ട്യൂബ്(ലിയോഫിലൈസ്ഡ്) | 48 ടെസ്റ്റ് | ||
പോസിറ്റീവ് നിയന്ത്രണം | 1*0.2ml ട്യൂബ് (ലയോഫിലൈസ്ഡ്) | 10 ടെസ്റ്റുകൾ | ലിസ്റ്റീരിയ മോണോസൈറ്റോജെൻസ് പ്രത്യേക ശകലങ്ങൾ അടങ്ങിയ പ്ലാസ്മിഡ് |
പിരിച്ചുവിടുന്ന പരിഹാരം | 1.5 മില്ലി ക്രയോട്യൂബ് | 500uL | / |
നെഗറ്റീവ് നിയന്ത്രണം | 1.5 മില്ലി ക്രയോട്യൂബ് | 200uL | 0.9%NaCl |
ഉപകരണങ്ങൾ
GENECHECKER UF-150, UF-300 തൽസമയ ഫ്ലൂറസെൻസ് PCR ഉപകരണം.
ഓപ്പറേഷൻ ഡയഗ്രം
a)
b)
പിസിആർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ
ശുപാർശ ചെയ്തക്രമീകരണം
ഘട്ടം | സൈക്കിൾ | താപനില (℃) | സമയം | ഫ്ലൂറസെൻസ് ചാനൽ |
1 | 1 | 50 | 8മിനിറ്റ് | |
2 | 1 | 95 | 2മിനിറ്റ് | |
3 | 40 | 95 | 5s | |
60 | 10സെ | FAM ഫ്ലൂറസെൻസ് ശേഖരിക്കുക |
*ശ്രദ്ധിക്കുക: FAM ഫ്ലൂറസെൻസ് ചാനലുകളുടെ സിഗ്നലുകൾ 60℃-ൽ ശേഖരിക്കും.
ടെസ്റ്റ് ഫലങ്ങൾ വ്യാഖ്യാനിക്കുന്നു
ചാനൽ | ഫലങ്ങളുടെ വ്യാഖ്യാനം |
FAM ചാനൽ | |
Ct≤35 | ലിസ്റ്റീരിയ മോണോസൈറ്റോജെൻസ് പോസിറ്റീവ് |
Undet | ലിസ്റ്റീരിയ മോണോസൈറ്റോജെൻസ് നെഗറ്റീവ് |
35 | സംശയാസ്പദമായ ഫലം, വീണ്ടും പരിശോധിക്കുക* |
*FAM ചാനലിന്റെ പുനഃപരിശോധനാ ഫലത്തിന് Ct മൂല്യം ≤40 ഉണ്ടായിരിക്കുകയും സാധാരണ “S” ആകൃതി ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ കർവ് കാണിക്കുകയും ചെയ്യുന്നുവെങ്കിൽ, ഫലം പോസിറ്റീവ് ആയി വ്യാഖ്യാനിക്കപ്പെടുന്നു, അല്ലാത്തപക്ഷം അത് നെഗറ്റീവ് ആയിരിക്കും.